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Elisa實(shí)驗:稀釋標準品實(shí)驗步驟
更新時(shí)間:2025-08-07瀏覽:45次

  Elisa實(shí)驗:稀釋標準品實(shí)驗步驟

  以下是ELISA實(shí)驗中標準品稀釋的詳細步驟總結,綜合多個(gè)實(shí)驗操作視頻的關(guān)鍵步驟:

  一、標準品稀釋前準備?

  試劑與耗材?

  7支空白EP管(編號S0-S6)

  標準品樣本稀釋液(如1x PBS或說(shuō)明書(shū)指定緩沖液) 本生試劑盒

  渦旋振蕩器、移液器(建議10-100μL和100-1000μL規格)

  標準品活化?

  凍干標準品需先離心1-2分鐘使粉末集中管底

  加入指定體積蒸餾水(如200μL),渦旋混勻5秒,靜置10-30分鐘至溶解

  二、標準品稀釋步驟?

  初始稀釋?

  在S6管中加入500μL標準品樣本稀釋液

  吸取溶解后的標準品母液500μL加入S6管,渦旋混勻5秒

  倍比稀釋?

  從S6管取500μL加入S5管,混勻

  重復上述步驟至S1管,S0管僅含稀釋液(空白對照)

  關(guān)鍵點(diǎn):每次稀釋需充分混勻,避免濃度誤差

  特殊處理?

  高濃度標準品(如血清樣本)需酸化處理:加鹽酸20μL混勻,孵育10分鐘后加氫氧化鈉20μL終止

  三、稀釋后操作?

  分裝與保存?

  現配現用,避免反復凍融

  分裝體積建議:50μL/孔(酶標板使用)

  質(zhì)量控制?

  檢查各管液體混勻狀態(tài),避免沉淀

  酸化樣本需20倍稀釋后使用

  四、常見(jiàn)問(wèn)題規避?

  錯誤示例?:未充分混勻導致梯度不線(xiàn)性

  解決方案?:使用排槍或自動(dòng)移液器降低操作誤差

  (注:具體稀釋比例需根據試劑盒說(shuō)明書(shū)調整,不同廠(chǎng)家標準品濃度可能差異較大)

  注:以上資料僅供參考,具體產(chǎn)品信息請咨詢(xún)技術(shù)老師或品牌供應商。

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